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 來源:實驗動物那些事兒 日期:2025.01.14 

齧齒類實驗動物常見的鞭毛蟲

鞭毛蟲屬於原蟲,即具有獨立完成(chéng)生命活動的單細胞真核生(shēng)物,在(zài)生物學分類上隸屬(shǔ)於(yú)肉足鞭毛門,鞭(biān)毛亞門,動物鞭毛綱。鞭毛蟲顧名思義,鞭毛為其特征,滋養體(tǐ)階段有一根或多根鞭毛,但也(yě)有些特殊種類為阿米巴型,會存(cún)在無鞭毛形態。本篇將介紹齧齒類動(dòng)物中常見的鞭毛蟲。

齧齒類實(shí)驗動物常見的腸道鞭毛蟲

01毛滴蟲

毛滴蟲隸屬於(yú)毛滴蟲目(Trichomonadida),毛滴蟲科(Trichomonadidae),該科分為兩(liǎng)個(gè)屬(shǔ),毛滴蟲屬(Trichomonas)和三毛(máo)滴(dī)蟲屬(Tritrichomonas)。目前已(yǐ)知至少有四種毛滴蟲可以感染齧齒(chǐ)類動物,包括小鼠三毛滴蟲(Tritrichomonas musculis)、人五毛滴蟲(Pentatrichomonas hominis)、鼠(shǔ)三毛(máo)滴蟲(Trichomonas muris)和微小三毛滴蟲(Tritrichomonas minuta)。其中鼠三毛滴蟲是齧齒類(lèi)實驗動物最常見的鞭毛蟲,它具有滋養體和假包(bāo)囊兩種存在形(xíng)式。其滋養體大(dà)小約18~24umx12~14um,呈梨形;假包囊呈球形,直徑約8um~13um。

包囊是原蟲在其生活階段中,由蟲體本身形成的一層較厚(hòu)的外膜,具有較強的抵抗作用;當這個外膜並非由蟲體本身形成,而(ér)是來源於宿(xiǔ)主,則稱為假包囊。在生活期或(huò)運動期,吸取外(wài)界營養而生長的蟲(chóng)體,稱為滋養體。滋養體較脆弱,無法在轉移宿主過程中存活,通(tōng)常不具有傳染(rǎn)性。鼠三毛滴蟲的假包囊是它的感染階段,假包囊對(duì)幹燥的環境抵抗不佳,一般存活不超過(guò)48h。

鼠三毛滴蟲的感染途徑是動物攝入或接觸到含有假包(bāo)囊的糞便或墊料等,假包囊進入(rù)到體內後,由消化液等作用轉化為(wéi)滋養體,滋養體在(zài)盲(máng)腸中增殖;滋養體進入到結腸後,由於環境幹燥,再(zài)次(cì)轉化為假包囊,隨後(hòu)排出體外。有資料顯示,在盲腸中滋(zī)養(yǎng)體和假包囊比例約為8:1,在結腸中滋養體和假包囊比例約為1:1。因此,在動物排出的糞便中,多數檢測到的(de)都是假包囊。雖然鼠三毛滴(dī)蟲一(yī)直以來(lái)被認為是非致病性鞭毛蟲,但也(yě)有資料顯示鼠三毛滴蟲可引起實驗動物的厭食(shí)和(hé)腹瀉。

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40× 紅色箭頭為鼠三毛滴蟲(chóng),可見明顯波動(dòng)膜

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40× 紅色箭頭為(wéi)毛滴蟲偽包囊,藍色箭頭為滋養體(tǐ)

02賈第鞭毛蟲

賈第鞭毛蟲在生物(wù)學分(fèn)類上隸屬(shǔ)於雙滴(dī)目(mù)(Diplomonadida),六鞭科(Hexamitidae),賈(jiǎ)第屬(Giardia),屬(shǔ)於致病性鞭毛蟲。賈第屬的(de)形(xíng)態很相似,但具有種屬特異性,因此根據宿主而分為不同的蟲種。感染齧齒類動物的蟲種有腸賈第(dì)鞭毛蟲(又(yòu)稱十二指腸賈第鞭毛蟲或藍氏(shì)賈第鞭毛蟲)(Giardia intestinalis/duodenalis/lamblia)、倉鼠賈第鞭毛蟲(chóng)(G. cricetidarum)、鼠賈第(dì)鞭毛蟲(G. muris)和微小賈第鞭毛(máo)蟲(G. microti)。腸賈第鞭毛蟲根據其基因(yīn)型被分為8個型,其中G型(xíng)會感染齧(niè)齒動物。

賈第鞭毛蟲具有滋(zī)養體和包囊兩種時期,滋養體呈典型(xíng)的(de)倒置梨形,呈“落葉”式運動;包囊呈卵圓形,長8~10um,寬7~10um。由於蟲體可在包囊內增(zēng)殖,所以有(yǒu)時可在包囊內看(kàn)見兩(liǎng)個或四個核。滋養體是其生長、發育和增殖期;四核的包囊則為感染期。賈第鞭毛蟲通過攝入或接觸含包囊的糞便或飲用水等進行傳播,包(bāo)囊進入消(xiāo)化道內,經胃酸刺激包囊會生成兩個滋養(yǎng)體;當滋養體到達空腸時(shí),又轉化成包囊。一般正常動物感染(rǎn)賈(jiǎ)第鞭(biān)毛蟲症狀不明顯,有時會出現(xiàn)體重減輕,毛(máo)發粗糙等症狀;但可能會導致免疫缺陷動物死亡。

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40× 紅色箭頭為賈第鞭(biān)毛蟲包囊

03鼠六鞭毛蟲

鼠六鞭毛蟲(Spironucleus muris,舊稱Hexamita muris)在生物學分(fèn)類上隸(lì)屬於雙滴目(Diplomonadida),六鞭(biān)科(Hexamitidae),六鞭(biān)屬(Hexamita)。鼠六鞭毛蟲具有(yǒu)滋養體和(hé)包囊(náng)兩種時期,滋養體呈細長梨形且兩側對稱,約7~9umx2~3um,呈直線快速運動;包囊(náng)呈橢圓形,約4x3um,包囊最多可含(hán)四個核(hé)。鼠六鞭毛蟲的生活史與賈第鞭毛蟲相似,體型比賈(jiǎ)第小很多。

鼠六鞭毛蟲感染成年鼠和免疫功能正(zhèng)常(cháng)鼠後一般無明顯症(zhèng)狀;但對於(yú)3-6周小鼠,易出現慢性腸(cháng)炎、體重(chóng)減輕等症狀,更(gèng)嚴重的會導致小鼠死亡(wáng)。小鼠和倉(cāng)鼠的鼠六鞭毛蟲(chóng)可以相互傳播,但大鼠的鼠六鞭毛蟲具有種屬(shǔ)特異性。

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40× 紅色箭頭為鼠(shǔ)六包囊

04唇鞭毛蟲

唇鞭(biān)毛蟲在生物學(xué)分類上隸屬於旋滴目(Retortamonadida),旋滴科(Retortamonadidae),唇鞭毛蟲屬(Chilomastix)。該屬(shǔ)目前已報道約29種,形態相似(sì)。鼠唇鞭毛蟲(Chilomastix bettencourti)寄生於齧齒動物(wù)盲腸中,具有滋養(yǎng)體和包囊兩個時期,包囊(náng)是感染期。滋養體呈梨形(xíng),約8.3~20.9umx6.6~8.4um;包囊呈檸檬型,約(yuē)15x7um。腸唇鞭(biān)毛蟲(Chilomastix intestinalis)寄生於豚鼠,也具有滋養體和包囊兩個時期。

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40× 紅色箭頭為鼠唇鞭毛(máo)蟲

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40× 紅色箭頭為唇鞭毛蟲包囊

旋滴科的另一代表屬為旋滴蟲屬(Retortamonas),這一屬形態和唇鞭毛(máo)蟲屬很相似,在豚鼠中(zhōng)發現過。如豚鼠內(nèi)滴蟲(Retortamonas caviae),具有滋養體和包囊兩種時期,滋養體呈梨形,約4~7umx2.4~4.3um;包囊呈(chéng)檸檬狀,約(yuē)4.2x3.5um。

05其(qí)他鞭毛蟲

還有(yǒu)一些不常(cháng)見的鞭毛蟲,如小鼠中曾發現過的倉鼠四毛滴(dī)蟲 (Tetratrichomonas microti)以及(jí)豚鼠中曾發(fā)現的脫莫室滴蟲( Oikomonas termo)、奧古旋滴蟲( Spiromonas augusta)和活動豚(tún)鼠毛滴蟲( Caviomonas mobilis)等。但目前僅(jǐn)有資料對這些鞭毛蟲的形態進行描述,其致病性及防治方麵研究甚少。

鞭毛蟲的檢(jiǎn)測

在進行鞭毛蟲檢測時,對於一些滋養體狀態的鞭毛蟲,鏡檢(jiǎn)法可容易(yì)檢出;但對於一些假包囊(náng)和包囊狀態(tài)的鞭毛蟲,就需要檢測人員有一定的(de)經驗積累。根(gēn)據上(shàng)述部分鞭毛蟲的生活史,在鏡檢時應盡量選擇新鮮回盲腸內容物,可通過辨認滋養體,從而提高檢出率。

核酸檢(jiǎn)測(cè)技術目前也常用在鞭毛蟲的檢測中,如PCR、qPCR、巢式PCR、LAMP技術等。PCR方法可以通(tōng)過擴增鞭毛蟲18S rRNA、16S rRNA、5.8s rRNA和ITS等保守基(jī)因,對鞭毛(máo)蟲達到種水平(píng)鑒(jiàn)定。但(dàn)由(yóu)於實驗動物感染鞭毛(máo)蟲的多樣性,對引物要求較高。因此,核酸(suān)檢測技術在鞭毛蟲的(de)鑒定分類應用上還有很大的(de)發展空間。

鞭毛蟲對動物的影響

雖然大部分鞭毛蟲均顯示對齧齒類實驗動物無(wú)致病性,但這些鞭毛蟲對齧齒類實(shí)驗動物的行為(wéi)改變和免疫狀態改變均應當引起重視。目前也有越來越多的研究顯示,鞭毛蟲可以影響齧齒類實驗動物細胞因子的分泌;對實(shí)驗動(dòng)物部分生理生(shēng)化(huà)指標的影響;引起動物腸道炎症等。

鞭毛蟲的預防和控製

規範動物房飼養流程,對(duì)進出人員(yuán)進行培訓管理,可以(yǐ)一定程度上預(yù)防(fáng)鞭毛蟲傳播。動物房應當建立控製蟲害管理程序,野生的齧齒動物攜帶很多寄生蟲,具有很大的潛在風險。首先一定要保證動物飲水和(hé)飼料的(de)潔淨度;選擇合適飼料,保證動物營養(yǎng),從而增加免疫力;動物飼養流程規範,避免不當操作而引起鞭毛蟲傳播;引入動物來源穩定,避免(miǎn)引(yǐn)入疫區動物而汙染屏障設(shè)施;不同等級動物分區飼養,避免(miǎn)交叉汙染;增加對設施內動(dòng)物質量監測頻率,都可以對鞭(biān)毛蟲的傳播起到(dào)預防作用。

在發現陽性(xìng)動物後,應迅速隔離陽性動物並進行篩(shāi)查,防(fáng)止擴散傳播。在飲用水中加(jiā)入硝基咪唑類藥物,如甲硝唑和替硝唑,可以對鞭毛蟲起到控製作用,但並不能完(wán)全清除;近年來有一(yī)些研究證明甲硝唑對大鼠(shǔ)和小鼠有致癌致突(tū)變性,替硝唑副作用較小。賈(jiǎ)第鞭毛蟲還可以選擇芬苯達唑、甲苯達唑和阿苯達(dá)唑。但若想對(duì)設施內鞭毛蟲進行完全清除,建議篩查並(bìng)淘汰陽性動物。淘(táo)汰陽性動物後,應及時清理汙染的糞便及(jí)墊料,並進行無害化處理;對汙染的籠具可進行高溫滅菌處理。

一般鞭毛蟲對消毒劑都比較敏感(gǎn),可(kě)使用季銨(ǎn)鹽類消毒劑對房間進行定期消毒處(chù)理,也可有效控製鞭毛蟲傳播。鞭毛蟲的(de)包囊和偽包囊對幹燥(zào)環境比較敏(mǐn)感,在幹燥環(huán)境(jìng)中存活時間(jiān)較(jiào)短,同時該時期也是大部分鞭毛蟲的感染期。保持動物飼養環境幹燥,也可以對鞭毛蟲傳播起到控製作用。

如需徹(chè)底清除鞭毛蟲,可以使用剖(pōu)腹產技術和胚胎移(yí)植技術達(dá)到淨化目的。

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